ראָמאַן קאָראָנאַווירוס (SARS-CoV-2) מולטיפּלעקס פאַקטיש-צייט פּקר קיט
דעם העכסט שפּירעוודיק, גרייט-צו-נוצן פּקר קיט איז בנימצא אין ליאָפיליזעד פֿאָרמאַט (פרירן-דריינג פּראָצעס) פֿאַר לאַנג-טערמין סטאָרידזש.די קיט קענען זיין טראַנספּאָרטאַד און סטאָרד אין צימער טעמפּעראַטור און איז סטאַביל פֿאַר איין יאָר.יעדער רער פון פּרעמיקס כּולל אַלע די רייידזשאַנץ דארף פֿאַר די פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן, אַרייַנגערעכנט פאַרקערט טראַנסקריפּציע, טאַק פּאָלימעראַסע, פּרימערז, פּראָבעס און דנטפּס סאַבסטרייץ.עס נאָר דאַרפֿן צו לייגן 13ul דיסטילד וואַסער און 5ul יקסטראַקטיד רנאַ מוסטער, און עס קענען זיין לויפן און אַמפּלאַפייד אויף די פּקר ינסטראַמאַנץ.
די qPCR מאַשין זאָל טרעפן די פאלגענדע רעקווירעמענץ:
1. פּאַסיק 8 פּאַס פּקר רער באַנד 0.2 מל
2. האָבן מער ווי פיר דיטעקשאַן טשאַנאַלז:
קאַנאַל | עקסייטיישאַן (nm) | Emission (nm) | פאַר-קאַלאַברייטיד דיעס |
1. | 470 | 525 | פאַם, סיבר גרין י |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ראָקס, טעקסאַס-רויט |
4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR פּלאַטפאָרמס:
7500 פאַקטיש-צייט פּקר סיסטעם, Biorad CF96, iCycler iQ ™ פאַקטיש-צייט פּקר דיטעקשאַן סיסטעם, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
די שוועריקייט פון טראַנספּערטיישאַן פון קאַלט קייט פון ראָמאַן קאָראָנאַווירוס נוקלעיק זויער דיטעקשאַן רייידזשאַנט
ווען קאַנווענשאַנאַל נוקלעיק זויער דיטעקשאַן רייידזשאַנץ זענען טראַנספּאָרטאַד אין לאַנג דיסטאַנסע, די (-20 ± 5) ℃ סטאָרידזש און טראַנספּערטיישאַן פון קאַלט קייט איז פארלאנגט צו ענשור אַז די ביאָאַקטיווע פון ענזיים אין די רייידזשאַנץ בלייבן אַקטיוו.צו מאַכן זיכער אַז די טעמפּעראַטור ריטשאַז די סטאַנדאַרט, עטלעכע קילאָגראַמס פון טרוקן ייַז זענען דארף פֿאַר יעדער קעסטל פון נוקלעיק זויער טעסטינג רייידזשאַנט אפילו ווייניקער ווי 50 ג, אָבער עס קען געדויערן בלויז צוויי אָדער דריי טעג.אין דער פּערספּעקטיוו פון ינדאַסטרי פיר, די פאַקטיש וואָג פון ריאַגאַנץ ארויס דורך מאַניאַפאַקטשערערז איז ווייניקער ווי 10% (אָדער פיל ווייניקער ווי דעם ווערט) פון דעם קאַנטיינער.רובֿ פון די וואָג קומט פון טרוקן ייַז, אייז פּאַקס און פּינע באָקסעס, אַזוי די טראַנספּערטיישאַן פּרייַז איז גאָר הויך.
אין מערץ 2020, COVID-19 אנגעהויבן צו ברעכן אויס אין אַ גרויס וואָג אין אויסלאנד, און די פאָדערונג פֿאַר ראָמאַן קאָראָנאַווירוס דיטעקשאַן רייידזשאַנט איז דראַמאַטיקאַלי געוואקסן.טראָץ די הויך פּרייַז פון עקספּאָרטינג די רייידזשאַנץ אין די קאַלט קייט, רובֿ מאַניאַפאַקטשערערז קענען נאָך אָננעמען עס רעכט צו דער גרויס קוואַנטיטי און הויך נוץ.
אָבער, מיט דער פֿאַרבעסערונג פון נאציאנאלע אַרויספירן פּאַלאַסיז פֿאַר אַנטי-פּאַנדעמיק פּראָדוקטן, ווי געזונט ווי די אַפּגריידינג פון נאציאנאלע קאָנטראָל איבער די שטראָם פון מענטשן און לאַדזשיסטיקס, עס איז פאַרלענגערונג און אַנסערטאַנטי אין די טראַנספּערטיישאַן צייט פון רייידזשאַנץ, וואָס ריזאַלטיד אין באַוווסט פּראָדוקט פּראָבלעמס געפֿירט. דורך די טראַנספּערטיישאַן.עקסטענדעד טראַנספּערטיישאַן צייט (טראַנספּערטיישאַן צייט פון וועגן האַלב אַ חודש איז זייער פּראָסט) פירט צו אָפט פּראָדוקט פייליערז ווען דער פּראָדוקט ריטשאַז די קליענט.דאָס האט דערשראקן רובֿ אַרויספירן ענטערפּריסעס פון נוקלעיק זויער רייידזשאַנץ.
ליאָפיליזעד טעכנאָלאָגיע פֿאַר פּקר רייידזשאַנט געהאָלפֿן די טראַנספּערטיישאַן פון ראָמאַן קאָראָנאַווירוס נוקלעיק זויער דיטעקשאַן רייידזשאַנט ווערלדווייד
די ליאָפיליזעד פּקר רייידזשאַנץ קענען זיין טראַנספּאָרטאַד און סטאָרד אין צימער טעמפּעראַטור, וואָס קענען ניט בלויז רעדוצירן די טראַנספּערטיישאַן קאָס, אָבער אויך ויסמיידן די קוואַליטעט פּראָבלעמס געפֿירט דורך טראַנספּערטיישאַן פּראָצעס.דעריבער, ליאָפיליזינג די רייידזשאַנט איז דער בעסטער וועג צו סאָלווע די פּראָבלעם פון אַרויספירן טראַנספּערטיישאַן.
ליאָפיליזאַטיאָן ינוואַלווז ייַז קאַלט אַ לייזונג אין אַ האַרט שטאַט, און דעמאָלט סאַבלימאַטינג און באַזונדער די וואַסער פארע אונטער וואַקוום צושטאַנד.די דאַר סאָלוטע בלייבט אין דעם קאַנטיינער מיט דער זעלביקער זאַץ און טעטיקייט.קאַמפּערד מיט קאַנווענשאַנאַל פליסיק רייידזשאַנץ, די פול-קאָמפּאָנענט ליאָפילייזד ראָמאַן קאָראָנאַווירוס דיטעקשאַן רייידזשאַנט געשאפן דורך לימינג ביאָ האט די פאלגענדע קעראַקטעריסטיקס:
גאָר שטאַרק היץ פעסטקייַט:עס קענען שטיין באַהאַנדלונג ביי 56 ℃ פֿאַר 60 טעג, און די מאָרפאָלאָגי און פאָרשטעלונג פון די רייידזשאַנט בלייבן אַנטשיינדזשד.
נאָרמאַל טעמפּעראַטור סטאָרידזש און טראַנספּערטיישאַן:ניט דאַרפֿן פֿאַר קאַלט קייט, ניט דאַרפֿן צו קראָם אין נידעריק טעמפּעראַטור איידער אַנסילינג, גאָר מעלדונג די קאַלט סטאָרידזש פּלאַץ.
גרייט-צו-נוצן:ליאָפיליזינג פון אַלע קאַמפּאָונאַנץ, ניט דאַרפֿן פֿאַר סיסטעם קאַנפיגיעריישאַן, אַוווידינג די אָנווער פון קאַמפּאָונאַנץ מיט הויך וויסקאָסיטי אַזאַ ווי ענזיים.
מולטיפּלעקס טאַרגאַץ אין איין רער:די דיטעקשאַן ציל קאָווערס ראָמאַן קאָראָנאַווירוס ORF1ab דזשין, N דזשין, S דזשין צו ויסמיידן די ווירוס גענאָוואַראַטיאָן.אין סדר צו רעדוצירן פאַלש נעגאַטיוו, מענטש RNase P דזשין איז געניצט ווי ינערלעך קאָנטראָל, צו טרעפן די קליניש נויט פֿאַר מוסטער קוואַליטעט קאָנטראָל.